芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
阵列芯片原理:从15µLof基质中的500,000个珠子开始。结果表明,阵列图像的定量分析大约一半的孔在珠子沉降几分钟后被占据。对于SimoaHD-1分析仪,沉降时间减少到90秒,分布在三个仪器处理周期之间。随着珠子重新沉降到阵列中,仪器对其他操作(密封和成像)进行索引,这些操作已经加载到阵列上。通常,会检测25,000-50,000个珠子。由于Simoa中的测量单位(AEB)是一个比率,一定珠装载量的差异不影响数据质量或在大多的范围内保持精度,前提是存在足够的珠子数量以保持在泊松噪声水平之上。22数据质量会受到影响,当泊松噪声主导测量误差时。这发生在与背景相关的正井数量降至约50个珠子以下时,此时泊松噪声明显影响测量的变异系数(CV)。
每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;科研数字ELISA检测
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将约5cm长的光纤束依次抛光使用30微米、9微米和1微米尺寸的金刚石研磨膜的机器。抛光光纤在0.025M盐酸溶液中化学蚀刻130秒,然后立即浸入水中以抑制反应。蚀刻后的光纤在水中复溶5秒,在水中洗涤5分钟,然后在真空下干燥。光纤束阵列的中心玻璃和包层玻璃的蚀刻速率差异caused4.5-μmdiameter孔在中心光纤中形成30。更初研究了不同蚀刻时间对孔深的影响。如果孔太深,则每个孔中沉积多个微珠。井口密封性被破坏;如果井口太浅,则无法将微球保留在井内,且观察到加载效率较差。对于单个微球而言,井口深度of3.25±0.5μm是比较好的,同时保持良好的密封性。 单分子级别数字ELISA高灵敏芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物实验室都能用的单分子检测;
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
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根据目标蛋白的抗体制备了功能化的微球生产商说明。含有目标蛋白的100-μL测试溶液与200,000个磁珠悬浮液孵育2小时至23°C。然后将磁珠分离并用PBS和0.1%Tween-20洗涤三次。磁珠重新悬浮后与含有检测抗体(通常约为1nM)的溶液孵育45分钟。在23°C下最小值。然后将珠子分别用PBS和0.1%洗涤三次。Tween-20。将珠子与含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分钟,然后分离并在PBSand0.1%Tween-20中洗涤六次。随后将珠子重悬于10μLofPBS中,并加载到飞升液位阵列中。整个实验的总时间约为~6小时。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,理论可达飞克级;
芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;
单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,多重检测,同时测试2-6个检测项目;单分子阵列数字ELISA高速检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,常规试剂可轻松达到0.2pg!科研数字ELISA检测
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品,与sioma产品的区别:
simoa产品为什么很难普及:主要问题:效果好、但成本高、平台庞大、不灵活、不开放;大部分实验室买不起设备!即使公用平台上了设备,大部分课题组也用不起耗材试剂!仪器:巨大,价格>300万;芯片+试剂:每套1万元以上;
Simoa的技术方案很难小型化,大部分反应流程都在芯片外进行,必须依赖大型自动化设备,与大部分生物实验室、医学实验室的灵活、低成本使用场景不符。 科研数字ELISA检测
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